Με την Ακολουθία του Ακάθιστου Ύμνου εκδηλώνονται ευχαριστίες και εγκώμια στο πρόσωπο της Παναγίας.

Αποτελείται, κατά βάση, από τον Ακάθιστο Ύμνο και τον Κανόνα του Ακάθιστου Ύμνου, πλαισιωμένα με ψαλμούς, απολυτίκια και ευχές.

Και τα δύο χαρακτηρίζονται ως αριστουργήματα της Βυζαντινής υμνολογίας, που εξαίρουν το έργο και το πρόσωπο της Υπεραγίας Θεοτόκου, με θεολογικό βάθος, κομψότητα λόγου, μουσικό κάλλος, αγιοπνευματική έμπνευση.

Στον Ιστορικό ναό του Αγίου Νικολάου στην παλιά πόλη του Ναυπλίου τελέσθηκε η ακολουθία του Ακάθιστου ύμνου χοροστατούντος του Μητροπολίτη Αργολίδος κ.κ Νεκταρίου.

Στον Ιερό ναό έχουν τεθεί προς προσκύνηση τεμάχια Ιερού Λειψάνου του Αγίου Λουκά επισκόπου Συμφερουπόλεως Κριμαίας του Ιατρού.